Дженнифер родилась в небольшом городке штата Калифорния, Шерман Оукс. Она жила в семье актеров: отец – Джон Энистон, и мать – Ненси Доу. В возрасте девяти лет девочка пережила развод родителей и осталась со своей матерью, но общаться с отцом ей не запрещалось. В одиннадцатилетнем возрасте Дженнифер начала свой актерский образ жизни, играя в кружке драмы школы. А более профессиональное обучение было продолжено в специализированной школе, специализировавшейся на актёрском мастерстве.  После того как она закончила обучение, стала подрабатывать курьером и проводить занятия по телефонному маркетингу. Но  в то же время не забывая про свое основное  ремесло, Дженнифер участвовала в нескольких постановках Бродвея.

Немного позже Энистон была приглашена на радио – шоу. А в 1990 году, переехав в Голливуд, начала делать свои первые актёрские шаги и получила роль в фильме «Лагерь Кукамонга». Впоследствии, после хорошего начала своей карьеры, ей предлагались роли в многосерийных фильмах. После съёмок в картине «Леприкон» (фильм ужасов), которую очень холодно встретили критики, Энистон пришлось серьезно задуматься о прекращении своей актерской карьеры. Но все ее планы о завершении работы немного изменились после того, как она попала на кастинг, проводящийся для съемок телесериала «Друзья», который вышел на американские телеэкраны еще в 1994 году. Дженнифер прекрасно подошла на роль, которая до этого предназначалась другой актрисе. На протяжении десяти лет она играла роль Рейчел Грин. Сериал удался на славу, был очень известен, особенно среди молодежи. Журналы, печатающие статьи об актёрах этого сериала, быстро раскупались. Многие девушки даже старались выглядеть, как эта замечательная актриса, копировали прическу, одевались в стиле своей любимой звезды. За съёмки в этом сериале Дженифер получала отличные гонорары, например, каждая серия последних трёх сезонов приносила актрисе по миллиону долларов. Благодаря этому фильму, девушке удалось превзойти многих других актрис. Она получила «Эмми», которого удостоилась за лучшую женскую роль. За эту же роль она получила престижную премию Золотой Глобус.

Съёмки сериала длились очень долго, но Дженнифер, конечно, не забывала и о личной жизни.  До благоприятного замужества, Энистон встречалась не с одним мужчиной, о чём рассказывал любой информационный сайт. Но действительно серьёзные отношения завязались у неё с Брэдом Питтом. В 2000 году во всеуслышание была озвучена новость о их бракосочетании, которое состоялось 29 июля. Но совместному проживанию пришел конец через пять лет.

В перерывах съемок сериала «Друзья» Дженнифер приходилось еще сниматься во многих фильмах, но не все роли были столь знамениты. Свою главную и первую роль Энистон сыграла в комедии с романтической концовкой «Портрет совершенства», это чудо произошло в 1997 году. Многие критики оценили фильм не слишком хорошо, но главная героиня была просто неотразима. После этой роли у Дженнифер появилось ещё больше предложений от разных режиссёров Голливуда.